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解析分光光度計(jì)儀器組成原理操作方法
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解析分光光度計(jì)儀器組成原理操作方法

 

 

 

儀器組成

分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃

原理

分光光度計(jì)采用個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測(cè)試的樣品后,分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度;

I0為入射的單色光強(qiáng)度;

I 為透射的單色光強(qiáng)度;

T 為物質(zhì)的透射率;

k 為摩爾吸收系數(shù);

L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;

c 為物質(zhì)的濃度;

 

操作方法

1.接通電源,打開儀器開關(guān),掀開樣品室暗箱蓋,預(yù)熱10分鐘。

2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至“1"檔(若零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0"時(shí),需選用較。)

3.根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動(dòng)波長選擇鈕。

4.將空白液及測(cè)定液分別倒入比色杯3/4處,用擦鏡紙擦清外壁,放入樣品室內(nèi),使空白管對(duì)準(zhǔn)光路。

5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器,使讀數(shù)盤針向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋,調(diào)節(jié)“100"調(diào)節(jié)器,使空白管的t=100,針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿,分別讀出測(cè)定管的光密度值,并記錄。

7.比色畢,關(guān)上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈


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